Hemmhöfe ermitteln: Empfindlichkeiten testen mittels Disk Diffusion und Gradienten-Test

Weitere effiziente Methoden der Empfindlichkeitstestung sind Disk Diffusion und Gradienten-Test. Die Testblättchen (disks) oder -streifen entfalten ihre Wirkung direkt auf der Agar-Oberfläche.

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Disk Diffusion & Gradienten-Test - Antibiotika auf dem Agar

Die beiden Methoden Disk Diffusion und Gradienten-Test dienen der Bestimmung bakterieller Empfindlichkeiten gegen Antibiotika. Bei beiden Methoden stellen wir eine bestimmte Keimzahl (Inokulum) eines Testorganismus her und verteilen diese mit Hilfe eines Watteträgers gleichmäßig auf einer Agar-Platte.

Bei der Disk Diffusion applizieren wir anschließend ein Testblättchen mit einer bestimmten Konzentration eines Antibiotikums auf dem Agar. Insgesamt können wir bis zu sechs verschiedene Testblättchen, d. h. sechs verschiedene Antibiotika pro Agar-Platte testen. Das Antibiotikum diffundiert in den Agar, kann dort seine Wirkung gegen den auf die Agar-Oberfläche applizierten Testorganismus ausüben und ihn gegebenenfalls hemmen. In diesem Fall ist nach der Inkubation ein durchsichtiger Hemmhof (d. h. kein Wachstum) des Testorganismus am Rande des Testblättchens zu erkennen. Anhand des Durchmessers dieses Hemmhofs bewerten wir die Empfindlichkeit des Testorganismus.

Der Gradienten-Test läuft ähnlich ab wie die Disk Diffusion, nur dass wir statt eines Testblättchens einen Teststreifen auf die beimpfte Agar-Platte aufbringen. Nach der Inkubation kann eine klare Ellipse zu erkennen sein, die bei einer bestimmten auf dem Teststreifen angezeigten Antibiotika-Konzentration den Streifen trifft. Dort lesen wir die minimale Hemmkonzentration (MHK, engl. MIC) des Testorganismus ab.

Die Bewertung in resistent oder sensibel nehmen wir bei beiden Methoden anhand der EUCAST Grenzwerttabelle vor.

Wir bieten die Disk Diffusion und den Gradienten-Test u.a. bei Ringversuchen an. So unterstützen wir unsere Kund:innen bei der Validierung ihrer Testmethode. Auch als individueller Baustein zur Erweiterung Ihres Projekts sind sie wertvoll. So können wir Sie umfassend bei der Entwicklung, der Zulassung und der anschließenden Überwachung Ihrer Substanz begleiten.

Damit wir Sie optimal unterstützen können, bieten wir Ihnen eine Komplett-Lösung an. Kontaktieren Sie uns noch heute für Ihre individuelle Beratung!

  • Individuelle Planung mit Ihnen als Kund:innen
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  • Professionelle Beratung zu Adaptionen des Versuchsablaufs
  • Erstellen eines Abschlussberichts (DE/EN) (optional)
  • Erstellen eines Publikationsmanuskripts (DE/EN) (optional)

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Dr. Esther Wohlfarth
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